Seroprevalencia de la Leishmaniasis Visceral Canina mediante Elisa con rK39 en Focos Endémicos de Venezuela / Seroprevalence of Canine Visceral Leishmaniasis by rK39-ELISA in Endemic Foci in Venezuela

En el presente trabajo se presenta la seroprevalencia de la leishmaniasis visceral canina (LVC), zoonosis causada por Leishmania infantum/chagasi. Se realizaron pruebas serológicas y examen clínico a 15.822 perros de 13 entidades federales endémicas para la leishmaniasis visceral en Venezuela, en el periodo 2004-2012. Los sueros fueron analizados mediante ELISA con el antígeno recombinante rK39. Los resultados muestran que 14,8% de la población de caninos son positivos para LV. Los estados Lara (19%) y Guárico (18%) mostraron una mayor prevalencia de la enfermedad. Sin embargo, para los años 2010-2012, la prevalencia de la LVC para las entidades federales como Anzoátegui, Aragua, Carabobo, Cojedes, Nueva Esparta y Sucre se mantuvieron entre un 3% y un 31%. Los caninos seropositivos (67,1% machos y 32,9% hembras) tenían edades promedio de 4,8±2,9 años. El 81% de los caninos seropositivos encontrados en estas zonas, no presentó signos clínicos característicos de LVC, mientras que la clínica presentada por el resto fueron ulceraciones cutáneas (8,5%), alopecia (9,4%) y onicogrifosis (19,2%). Este reporte muestra la distribución geográfica (tanto en zonas rurales como urbanas) y características clínicas más resaltantes de perros parasitados en las diferentes regiones endémicas del país, con el fin de tomar medidas estratégicas que fortalezcan los programas de control y prevención de esta zoonosis problema de salud pública.

This study discloses the seroprevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL), a zoonotic disease caused by Leishmania infantum/chagasi. In this study, serological tests and clinical examinations were performed in 15,822 dogs from 13 federal entities endemic for visceral leishmaniasis in Venezuela, during the period 2004-2012. Serum samples were analysed by ELISA against the recombinant antigen rK39. Results demonstrated a prevalence of 14.8% of positive dogs for VL. Lara (19%) and Guárico (18%) states showed the highest seroprevalence of the disease. However, for the years 2010-2012, the prevalence of CVL for federal entities as Anzoátegui, Aragua, Carabobo, Cojedes, Nueva Esparta, and Sucre remained between 3% and 31%. The seropositive canines (67.1% males and 32.9% females) average 4.8±2.9 years of age and 81% of the dogs found in these endemic areas did not show clinical signs characteristic of LVC, while clinical symptoms presented by the rest were skin ulceration (8.5%), alopecia (9.4%) and onychogryphosis (19.2%). This report demonstrates the geographical distribution (both rural and urban) and most striking clinical features of parasitized dogs in different endemic regions of the country, in order to take strategic actions to strengthen the control and prevention programs of this public health problem.

Células inflamatorias en la secreción nasal y citocinas proinflamatorias Th1, Th2, Th17 y reguladoras en el suero de pacientes con leishmaniasis cutánea Americana / Inflammatory cells in the nasal secretion and serum pro-inflammatory Th1, Th2, Th17 and regulatory cytokines from American cutaneous leishmaniasis patients

En la forma mucocutánea (LCM) y cutánea (LCL) de la leishmaniasis, se genera una respuesta inflamatoria cuyos mediadores (células y citocinas) se han involucrado en la severidad de las úlceras y en el daño tisular observado en estos pacientes, particularmente en los LCM. Por ello, nos propusimos identificar los grupos celulares predominantes en la secreción nasal de pacientes con LCL y LCM, y relacionarlos con citocinas proinflamatorias y reguladoras. Evaluamos en pacientes LCL (n=20), LCM (n=14) y 20 individuos sanos: a) La cuantificación de tipos de leucocitos en "frotis" de secreción nasal, úlceras cutáneas y sangre periférica teñidos con Giemsa empleando microscopía óptica, b) Concentraciones séricas de IL-8, IL-4 e IL-10 por citometría de flujo (CBA array) e IFN-γ, TNF-α e IL-17 por ELISA. El grupo celular predominante en la secreción nasal de pacientes con LCM fueron los neutrófilos (80,7%) y escasos eosinófilos (0,6%), comparados con los LCL y controles, en los que no se observaron estas células. Mientras que los "frotis" de las ulceras de los LCL presentaron 45,3% de neutrófilos y 43% de linfocitos. En contraste, en sangre periférica, de los pacientes se observó un incremento de neutrófilos y linfocitos junto a una frecuencia significativa de monocitos (LCM: 5,3; LCL: 6,3%) y eosinófilos (LCM: 8,2%; LCL: 5,2%). Todo esto sugiere la participación de los neutrófilos en la inmunopatogénesis en la LCM. Adicionalmente, se demostró una mayor (P=0,03) concentración sérica de IL-8 en los pacientes con LCL (18,5ρg/mL) y LCM (18,2ρg/mL) respecto a los individuos sanos, sugiriendo que esta citocina promueve el reclutamiento de neutrófilos al sitio de infección en los LCM, mientras que en los LCL contribuyen junto con los linfocitos T CD4+ de la subpoblación Th1 y productores de IFN-γ, en la activación de mecanismos leishmanicidas.

In mucocutaneous (MCL) and cutaneous (LCL) leishmaniasis, the inflammatory mediators (cytokines and cells) have been associated with ulcers severity and tissue damage observed in these patients, particularly in MCL. Therefore, we decided to identify the predominant cell groups in the nasal secretion of LCL and MCL patients, and related pro-inflammatory and regulatory cytokines. It was evaluated in LCL (n = 20), MCL patients (n = 14) and 20 healthy volunteers: a) Differential leukocyte count by optical microscopy performed in: smear of a runny nose, skin ulcers and peripheral blood dyed with Giemsa, b) serum levels of IL-8, IL-4 and IL-10 using cytometric bead array (CBA) assay and IFN-γ, TNF-α and IL-17 by ELISA. In MCL patients, neutrophils (80.7%) were the most abundant cellular group in nose secretion, followed by a small amount of eosinophils (0.6%) compared to the LCL and controls, where no such cells were observed. In contrast, in peripheral blood from ACL patients were observed an abundant amount of neutrophils and lymphocytes together with a significant frequency of monocytes (MCL:5.3%; LCL: 6.3%) and eosinophils (MCL:8.2%; LCL:5.2%). While the smear from skin ulcers of LCL patients showed 45.3% of neutrophils and 43% lymphocytes. All of these indicate that neutrophils might play a role in the MCL immunopathogenesis. Moreover, an increased serum levels of IL-8 (P=0.03) were found in LCL (18.5ρg/mL) and MCL (18.2ρg/mL) patients, suggesting that this cytokine promotes the recruitment of neutrophils to the infection site in MCL; while in LCL patients may contribute with CD4 + Th1 (IFN-γ) cells in the activation of leishmanicida mechanisms.

Expresión de TLR2, 4, 9 y presencia de células tipo NK CD56 positivas en lesiones de pacientes con diferentes formas de clínicas de leismaniasis cutánea americana / Expression of TLR2, 4, 9 and presence NK type CD56 positive cells lesions of patients with different clinical forms of American cutaneous leishmaniasis

La leishmaniasis cutánea americana (LCA) presenta varias manifestaciones clínicas e inmunitarias: La leishmaniasis cutánea localizada (LCL), cuya respuesta inmunitaria es tipo Th1, la leishmaniasis cutánea difusa (LCD) con una respuesta Th2, y la leishmaniasis cutánea intermedia (LCI) cuya respuesta inmunitaria es exacerbada con un patrón mixto de citocinas. Se ha demostrado la importancia de los receptores tipo toll (TLR) en la respuesta inmunitaria frente a Leishmania promoviendo la transcripción y síntesis de citocinas inflamatorias. El reconocimiento de componentes del parásito por los TLRs activa a macrófagos, células dendríticas y células NK. En este estudio, evaluamos la presencia TLR2, TLR4, TLR9 y células tipo NK (NK y NKT CD56+) en las lesiones de pacientes con LCL, LCI y LCD mediante inmunocitoquímica. Las lesiones de LCL y LCD mostraron una alta densidad de células TLR2 y TLR4+ con respecto a LCI, mientras que LCD mostró una mayor densidad de células TLR9+. Se observó también la expresión de TLR2 en los queratinocitos y el TLR9 se localizó en el interior de los macrófagos infectados asociado con los parásitos. La densidad de células CD56+ fue mayor en LCL en comparación con LCI y LCD. Los resultados demuestran la participación de los TLR2, 4 y 9 en la respuesta inmunitaria durante la LCA, mostrando evidencia del reconocimiento del parásito por TLR9 y una mayor densidad de células NK en LCL que se puede asociar a la respuesta Th1 que prevalece en estos pacientes.

American cutaneous leishmaniasis (ACL) has several clinical and immunological manifestations: localized cutaneous leishmaniasis (LCL) that produces a Th1 immune response, diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL) that produces a Th2 response, and intermediate cutaneous leishmaniasis (ICL) that promotes an exacerbated immune response with a mixed pattern of cytokines. The importance of toll-like receptors (TLRs) to the immune response has been demonstrated against Leishmania, as these promote the transcription and synthesis of inflammatory cytokines. Parasite components are recognized by TLRs leading to the activation of macrophages, dendritic cells and NK cells. In this study, we evaluated the presence of TLR2, TLR4, TLR9 and NK/NKT CD56+ cells by immunocytochemistry in the lesions of patients with LCL, ICL and DCL. LCL and DCL lesions showed higher densities of TLR2 and TLR4 cells than ICL, while DCL showed an increase in TLR9 + cell density. The expression of TLR2 in keratinocytes was also observed, and TLR9 was located inside the infected macrophages in contact with the parasites. NK cell density was higher in LCL compared with ICL and DCL. These results demonstrate the participation of TLR2, 4 and 9 in the immune response during ACL, and show evidence of parasite recognition by TLR9 and increased CD56+ cell density in LCL associated with the Th1 response which prevails in these patients.

Chemokines and chemokine receptors expression in the lesions of patients with American cutaneous leishmaniasis

American cutaneous leishmaniasis (ACL) presents distinct active clinical forms with different grades of severity, known as localised (LCL), intermediate (ICL) and diffuse (DCL) cutaneous leishmaniasis. LCL and DCL are associated with a polarised T-helper (Th)1 and Th2 immune response, respectively, whereas ICL, or chronic cutaneous leishmaniasis, is associated with an exacerbated immune response and a mixed cytokine expression profile. Chemokines and chemokine receptors are involved in cellular migration and are critical in the inflammatory response. Therefore, we evaluated the expression of the chemokines CXCL10, CCL4, CCL8, CCL11 and CXCL8 and the chemokine receptors CCR3, CXCR3, CCR5 and CCR7 in the lesions of patients with different clinical forms of ACL using immunohistochemistry. LCL patients exhibited a high density of CXCL10+, CCL4+ and CCL8+ cells, indicating an important role for these chemokines in the local Th1 immune response and the migration of CXCR3+ cells. LCL patients showed a higher density of CCR7+ cells than ICL or DCL patients, suggesting major dendritic cell (DC) migration to lymph nodes. Furthermore, DCL was associated with low expression levels of Th1-associated chemokines and CCL11+ epidermal DCs, which contribute to the recruitment of CCR3+ cells. Our findings also suggest an important role for epidermal cells in the induction of skin immune responses through the production of chemokines, such as CXCL10, by keratinocytes.

Citocinas reguladoras (IL-10 y TGF-B) en pacientes con leishmaniasis cutánea Americana / Regulatory cytokines (IL-10 and TGF-B) in American cutaneous leishmaniasis patients

La leishmaniasis cutánea Americana (LCA) presenta un espectro clínico e inmunológico, donde las formas intermedias se asocian con respuestas celulares exacerbadas frente a Leishmania spp., que pueden reflejar defectos de inmunoregulación. Debido a que la IL-10 y el TGF-β son algunos de los factores importantes en modular la respuesta inmunitaria, nos propusimos establecer si existen alteraciones en su producción entre las diferentes manifestaciones de la leishmaniasis cutánea. Se estudiaron individuos con leishmaniasis cutánea: localizada (LCL n=20), mucocutánea (LCM n=14), intermedia (LCI n=20), difusa (LCD n=12) y 22 voluntarios sanos. La IL-10 se determino por citometría de flujo y el TGF-β por ELISA en muestras de plasma y en sobrenadantes de cultivos linfocitarios de pacientes y controles, estimulados "in vitro" con L. braziliensis. Se evidenció una baja producción de IL-10 en los pacientes con LCI respecto a los LCM y LCD. Mientras que en plasma, no se observaron variaciones en la concentración de esta citocina entre los diferentes grupos. En contraste, el TGF-β estuvo incrementado significativamente en concentración y frecuencia de individuos respondedores en todos los grupos de pacientes respecto a los controles, siendo más elevado en los pacientes LCM asociado con un Odds Ratio muy elevado (87). Luego de estimulación con L. braziliensis, los pacientes con LCM continúan mostrando una mayor producción de TGF-β que los pacientes con LCI y LCD. En general, nuestros resultados sugieren que la IL-10 y el TGF-β pudiesen estar mediando supresión en los pacientes con LCD y una inadecuada inmunoregulación en los pacientes con LCI por el escaso nivel de estas. En los pacientes LCM, ambas citocinas fallan en modular la respuesta exacerbada presente en ellos. Otros mecanismos de regulación deben de ser investigados en futuros estudios.

American cutaneous Leishmaniasis shows a clinical and immunological spectrum, where intermediate forms are associated with exacerbated cell responses against Leishmania spp., which may reflect defective immunoregulation. Since IL-10 and TGF-β modulate the immune response, we aimed to establish whether there are changes in its production between the different manifestations of cutaneous leishmaniasis. We studied individuals with cutaneous leishmaniasis: localized (LCL n = 20), mucocutaneous (MCL n = 14), intermediate (ICL n = 14), diffuse (LCD n = 12) and twenty two healthy subjects. The IL-10 was determined by flow cytometry and TGF-β by ELISA in plasma and in supernatants of lymphocyte cultures from patients and controls stimulated in vitro with L. braziliensis. The results showed a low production of IL-10 in patients with intermediate or chronic leishmaniasis compared to MCL and DCL patients. There were no changes in plasma concentration of this cytokine among the different groups. In contrast, the TGF-ß was significantly increased in concentration and frequency of respondents in all groups of patients compared to controls, being higher in MCL patients associated with an elevated odds ratio (87). After stimulation with L. braziliensis, the MCL patients continue to show increased production of TGF-β compared to ICL and LCD patients. Overall, our results suggest that IL-10 and TGF-β could be mediating suppression in DCL patients and an inadequate or defective regulation in ICL patients by the low level of these cytokines. In MCL patients, both cytokines fail to modulate their exacerbated response. Other regulatory mechanisms must be investigated in future studies.

Herramientas no invasivas en Venezuela: comparación entre las pruebas inmunoserológicas DAT, rK26 y rK39 en el diagnóstico de leishmaniasis visceral / Non invasive diagnostic tools for visceral leishmaniasis: a comparison of the immunoserological tests DAT, rK26 and rK39

Introducción. La leishmaniasis visceral constituye un problema de salud pública en los países en donde es endémica por ser potencialmente letal, principalmente en niños. El diagnóstico rápido es importante en el control de la enfermedad. Objetivo. Comparar las pruebas inmunocromatográficas rK39 (rK39 dipstick, Kalazar detect test, Inbios Internacional Inc.), ELISA rK26 y la prueba de aglutinación directa (Kit Biomedical Research) en relación con la prueba de ELISA rK39, como herramientas serodiagnósticas para la leishmaniasis visceral en Venezuela.Materiales y métodos. Se estudiaron 50 muestras séricas de pacientes positivos por la prueba ELISA rK39, provenientes de diferentes zonas endémicas: Nueva Esparta, Lara, Anzoátegui y Trujillo; se incluyeron 17 muestras de voluntarios sanos y 25 de pacientes con otras enfermedades. Se utilizó la prueba ELISA rK39 como método de referencia, considerándola como patrón de referencia imperfecto, a partir del cual se determinaron los valores de sensibilidad, especificidad, razón de verosimilitud y valores diagnóstico positivo y negativo en las demás pruebas evaluadas. Resultados. Todas las pruebas mostraron una fuerte correlación (p<0,0001) con la ELISA rK39. La aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron altos valores de sensibilidad, 89,74% (IC95% 81,34-98,15) y 94,15% (IC95% 87,65-100), respectivamente, y de especificidad, 81% (IC95% 79,96-99,51) y 100% (IC95% 100-100). La prueba ELISA rK26, a pesar de poseer buena especificidad, 99% (IC95% 95,17-100), tuvo baja sensibilidad, 37% (IC95% 23,41-50,15). Conclusión. Las pruebas de aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron los mayores valores de sensibilidad y especificidad. Ambas son simples, económicas y fácilmente aplicables. Por ello, son recomendables para efectuar un diagnóstico de leishmaniasis visceral eficaz y precoz en Venezuela.

Introduction. Human visceral leishmaniasis is a serious public health problem in endemic countries because of its high potential lethality, particularly in children. Rapid diagnosis is essential to early treatment and control of visceral leishmaniasis.Objective. The aim was to compare three serodiagnostic tools for human visceral leishmaniasis. Materials and methods. Three methods were compared: the rK39 dipstick (Kalazar detection test, Inbios International Inc.), ELISA rK26 and direct agglutination test (DAT) (KIT Biomedical Research). Fifty serum samples from patients positive for rK39 ELISA were compared from four endemic provinces in Venezuela: Nueva Esparta (Margarita island), Lara, Anzoátegui and Trujillo. Additional serum samples from 17 healthy volunteers and 25 patients with other diseases were included. The rK39 ELISA served as the baseline standard method. Sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and likelihood ratio were calculated for each test. Results. All methods had a positive correlation with rK39 ELISA (p<0.0001). They showed high sensitivity and specificity. The direct agglutination test and the rK39 dipstick showed high sensitivity values, 89.7% (95% CI: 81.34.0-98.2%) and 94.2% (95% CI: 87.7-100%), respectively, and high specificity, 81.0% (95% CI: 80.0-99.5%) and 100%. The rK26 ELISA showed good specificity, 99% (95% CI: 95.2-100%), but a very low sensitivity, 37% (95% CI: 23.4-50.2%). Conclusion. Overall results indicated that DAT and rK39 dipstick have the highest specificity and sensitivity. Both are simple, cost-effective and field applicable tests. Therefore, they are recommended for early and accurate diagnosis of visceral leishmaniasis.

Evaluación de una prueba de aglutinación directa como método alternativo para el diagnóstico de leishmaniasis visceral canina y humana en Venezuela / The direct agglutination test as an alternative method for the diagnosis of canine and human visceral leishmaniasis

Introduction. Visceral leishmaniasis is the most severe clinical form of leishmaniasis and is often fatal without proper treatment. Therefore, early and accurate diagnosis is important, but often difficult in endemic areas. Objective. The aim was to evaluate a direct agglutination test as a potential visceral leishmaniasis diagnostic method in endemic areas of Venezuela Materials and methods. The performance of the direct agglutination test, based on freezedried Leishmania donovani antigen was evaluated under laboratory conditions using serum samples of humans and dogs from several Venezuelan visceral leishmaniasis endemic areas: Nueva Esparta (Margarita Island), Lara, Anzoátegui and Trujillo Status. The study included confirmed visceral leishmaniasis patients (n=30), visceral leishmaniasis suspected subjects (n=4), healthy controls (n=19) and patients with other confirmed diseases (n=20). In addition, 24 serum samples from dogs with confirmed visceral leishmaniasis and 18 healthy control dogs were tested. Results. All serum samples of visceral leishmaniasis patients, either active or recovered, were positive. They showed anti- L. donovani titers above 1:1600. Three out of four suspected visceral leishmaniasis cases were also positive, while serum samples from endemic controls and patients with other diseases had titers lower than 1:800. A sensitivity of 100 percent was obtained for all threshold levels under consideration and 100 percent specificity at the threshold titer of 1:800 (95 percent confidence interval: 91-100 percent). A 93 percent sensitivity (95 percent confidence interval: 76-99 percent) was observed in dog samples, with 100 percent specificity (95 percent confidence interval: 79-100 percent) at the threshold titer of 1:200. Conclusion. The direct agglutination test seems suitable for use in epidemiological studies and for serological diagnosis of human visceral leishmaniasis and canine visceral leishmaniasis.

Introducción. La leishmaniasis visceral es la forma clínica más grave de la leishmaniasis. Ésta puede ser fatal si no se administra el tratamiento adecuado. Por ello, el diagnostico temprano es importante, pero a menudo difícil, en las áreas endémicas. Objetivo. Evaluar el potencial de la prueba de aglutinación directa como un método para el diagnóstico de leishmaniasis visceral en zonas endémicas de Venezuela. Materiales y métodos. La efectividad de la prueba de aglutinación directa con el antígeno congelación-descongelación de Leishmania donovani fue evaluada bajo condiciones de laboratorio usando muestras de sueros de humanos y perros provenientes de diferentes regiones endémicas de leishmaniasis visceral de Venezuela: Nueva Esparta (Isla de Margarita), Estados Lara, Anzoátegui y Trujillo. Se incluyeron pacientes con diagnóstico confirmado de leishmaniasis visceral (n=30), sospecha de leishmaniasis visceral (n=4), voluntarios sanos (n=19) y pacientes con otras enfermedades (n=20). Además, se evaluaron 24 muestras de suero de perros con leishmaniasis visceral y 18 controles. Resultados. Todas las muestras de los pacientes con leishmaniasis visceral activa o curada fueron positivas. Mostraron títulos anti-L. donovani por encima de 1:1.600. Tres de cuatro casos con sospecha de leishmaniasis visceral también resultaron positivos a la prueba, mientras que los sueros controles y los de los pacientes con otras patologías dieron títulos por debajo de 1:800. Se obtuvo una sensibilidad de 100% a todos los puntos de corte considerados y una especificidad de 100% al punto de corte de 1:800 (intervalo de confianza de 95%, IC95%: 90,97%-100%). Las muestras de perros mostraron una sensibilidad de 92,59% (IC95%: 75,69%- 99,09%) y 100% de especificidad (IC95%: 79,42%-100%) al punto de corte de 1:200. Conclusión. En general, nuestros resultados indican que el uso de la prueba de aglutinación directa es apropiado para la realización de estudios epidemiológicos y para el...

Sífilis secundaria nodular: reporte de un caso / Secondary nodular syphilis: report of a case

Las lesiones cutáneas de la sifilis secundaria varían ampliamente así como sus características histopatológicas. Las lesiones nodulares han sido descritas como una manifestación atípica de sífilis secundaria en estadios avanzados de la misma. Dado lo infrecuente de esta forma clínica y su particularidad histólogica como dermatitis granulomatosa, se describe un caso clínico representativo de sífilis secundaria nodular

Estudio clínico, epidemiológico y caracterización taxonómica de leishmaniasis cutanéa en el Estado Vargas-Venezuela / Clinical and epidemiological study including taxonomic characterization of cutaneous leishmaniasis en Vargas State-Venezuela

En este trabajo se presentan los resultados obtenidos al realizar un estudio prospectivo entre marzo de 2001 y febrero 2003 (24 meses), período en el cual se diagnósticaron clínicamente 92 pacientes con leishmaniasis cutánea (LC), evaluados en la consulta de Dermatología Sanitaria del Ambulatorio La Guaira, cuya área de influencia es todo el Estado Vargas (EV), obteniéndose confirmación parasitológica en 89 de los casos estudiados. De los 89 pacientes con confirmación parasitológica en 89 de los casos estudiados como LCL y 4 (4,49 por ciento) como LCL. Los análisis realizados revelaron que 60/89 (67,41 por ciento) fueron pacientes de sexo masculino. La edad promedio fue de 31,22 años con una desviación estándar de 18,02. la incidencia fue de 14,35 por 100.000 habitantes, la Parroquia de mayor incidencia fue Caruao con 266,93 por 100.000 habitantes, seguida por Macuto con 37,6. Según el probable lugar de infección, en Caruao se reportaron el 26,97 de los casos, seguido por Macuto con el 16,85 por ciento y La Guaira con 14,61, 4 pacientes declararon haberse infectado en otros estados. Según las pruebas diagnósticas empleadas, la leishmanina fue positiva en el 95,35 por ciento, el frotis por escarificado en el 70,24 por ciento, el frotis por aposición en el 59,21 por ciento; el 43,84 por ciento de los cultivos fueron positivos, 27,4 por ciento negativo y 28,77 por ciento resultaron contaminados. En cuanto a la reacción en cadena de la polimerasa (RCP), de las 68 muestras procesadas a igual número de pacientes, el 77,94 por ciento fueron positivas para Leishmania braziliensis, ninguna para L. mexicana. La lesión tipo úlcera fue la más frecuente (93,26 por ciento). El 52,81 por ciento de los pacientes mostraron lesiones en miembros inferiores, 41,57 por ciento en miembros superiores, 22,47 por ciento en tronco y 7,87 por ciento en la cabeza. El 78,65 por ceinto mostró 2 ó menos lesiones, con diamétro variable entre 2 mm y 80 mm, cn una media de 20,9 mm. Según la ocupación el grupo más afectado fue el de los agriculturos con el 26,97 por ciento de los pacientes, seguidos por estudiantes (19,1 por ciento) y del hogar (15,73 por ciento)

Programa control de la leishmaniasis visceral en Venezuela / Program control of the leishmaniasis visceral in Venezuela

La Leishmaniasis visceral (LV), o Kala-azar, es una enfermedad infecciosa parasitaria, potencialmente mortal, con amplia distribución geográfica tanto en el viejo como en el nuevo mundo. Su permanencia es asegurada por la existencia de una cadena epidemiológica constituida por fuentes de infección, agentes transmisores y hospedadores susceptibles. La leishmaniasis visceral es conocida en la India desde el siglo XIX, pero fue Leishman (1903) quien describió La Leishmania en muestras de bazo tomadas a un soldado irlandés proveniente de la India, identificándolas como formas degeneradas de Trypanosoma. También Donovan (1903) describe tres casos de fiebre negra o Kala-azar provenientes de la India, donde observó flagelos que no se parecían a los tripanosomas descritos por Leishman. En América, la LV fue descrita por primera vez por Migone (1913), en la Asunción, Paraguay, en un paciente de Mato Grosso, Brasil. Cunha y Chagas (1973) proponen el nombre de Leishmania Chagasi el agente causal de la LV en este continente. En Venezuela Martínez y Pons (1941) dieron a conocer el primer caso autóctono procedente de las Mercedes, estado Guárico, y años después, en 1970, Torrealba publica su tesis doctoral donde describe un total de 174 casos registrados en el país en el período de 1941-1969m distribuidos en los estados Zulia, Guárico, Cojedes, Carabobo, Aragua, Trujillo, Lara, Falcón, Portugesa, Distrito Federal, Anzoátegui, Monagas, Bolívar, Sucre y Nueva Esparta

Epidemiological aspects of human and canine visceral leishmaniasis in Venezuela

OBJECTIVE: To report recent data on the distribution of human and canine visceral leishmaniasis (VL) in Venezuela, and to highlight problems associated with effective control measures. METHODS: We report the number of cases, incidence rate, age and sex distribution, and mortality rates for human VL (HVL) for the period of 1995 through 2000, based on National Registry of Leishmaniasis data. We carried out serological studies on a total of 3 025 domestic dogs from the 12 states in Venezuela reporting cases of human VL in this 1995-2000 period and also from the state of Yaracuy, where cases were reported earlier during the decade of the 1990s. RESULTS: From 1995 through 2000, 242 cases of HVL were reported from 12 states, in various sections of Venezuela. There was a relatively stable national incidence rate of 0.2 cases per 100 000 persons per year. Of the 242 cases, 26.0 percent were from Margarita Island, one of the three islands that make up the state of Nueva Esparta (Margarita Island was the only one of the Nueva Esparta islands that had HVL cases). Over the 1995-2000 period, the annual incidence rates for Nueva Esparta ranged from 1.7 to 3.8 cases per 100000 population. Males in Venezuela were more frequently affected (59.5 percent) than were females (40.5 percent). In terms of age, 67.7 percent of the VL patients were < 4 years of age, and 80.6 percent were younger than 15 years. The mortality rate among the persons with VL was 7.85 percent during the 1995-2000 period. Serological screening with rK39 antigen of 1217 dogs from Margarita Island found a 28.5 percent positivity rate (testing of dogs was not done on the two other islands of Nueva Esparta). In contrast, the rate was 2.8 percent in the 1 808 samples from dogs from 12 states on the mainland. CONCLUSIONS: Human and canine VL are unevenly distributed in Venezuela. The distribution may reflect such factors as differences among the states in human population density, vector density, and the presence or absence of other trypanosomatidae. Particularly high infection rates in very young children as well as in domestic dogs occur in semiurban communities of Nueva Esparta, where other human-infecting trypanosomatidae have not been reported. Control measures related to limiting canine infection might contribute to disease control where VL infections are frequent. Reducing VL mortality requires increased awareness among medical professionals of the possibility of VL in the differential...

Epidemiological and immunological aspects of human visceral leishmaniasis on Margarita Island, Venezuela

Sixty-five patients were diagnosed with visceral leishmaniasis (VL) on Margarita Island in the decade from 1990 to1999; 86.2 percent were <= 3 years old. All were leishmanin-negative at diagnosis. Evaluation of 23 cured patients in 1999 revealed that 22/23 had converted to leishmanin-positive; five had persisting antibodies to rK39 antigen, with no clinical evidence of disease. Leishmanin tests were positive in 20.2 percent of 1,643 healthy individuals from 417 households in endemic areas. Of the positive reactors, 39.8 percent were identified in 35 (8.4 percent) of the households, 15 of which had an antecedent case of VL, a serologically positive dog or both. Weak serological activity to rK39 antigen was detected in 3 of 488 human sera from the endemic areas. The presence of micro-foci of intense peri-urban transmission and the apparent absence of other Trypanosomatidae causing human disease offer a unique opportunity for the study of reservoirs, alternative vectors and evaluation of control measures on the Island

Estudio clínico epidemiológico y caracterización taxonómica de leishmaniasis tegumentaria americana: en la comunidad de Birongo, Municipio Brión estado Miranda / Clinical epidemiological study and taxonomical characterization of american tegumentary a leishmaniasis at the Birongo, community Municipium Brion Miranda

La Leishmaniasis Tegumentaria Americana (LTA) es una enfermedad parasitaria producida por protozoarios intracelulares de la familia Trypanosomatidae del género Leishmania, transmitida por la picada de mosquitos vectores del género Lutzomyia, que afecta piel y mucosas. Este trabajo es un estudio prospectivo realizado entre enero de 2001 y enero del 2002 en la comunidad de Birongo del Municipio Brión, Estado Miranda, en donde se evaluaron 40 pacientes con clínica sugestiva de LTA, encontrándose 38 (95 por ciento) con leishmaniasis Cutánea Mucosa(LCM). La leishmania resultó positiva en 32 pacientes (97 por ciento). Los resultados de biopsia reportaron granuloma por agente vivo (GAV) en 100 por ciento de los casos. En el frotis por aposición, resultó positiva para LCL en 50 por ciento de los casos. La identificación taxonómica se realizó por PCR y se determinó que corresponden al género Leishmanía, especie L braziliensis. Diesiseis con siete por ciento (16,7 por ciento) de los cultivos resultó positivo para los flagelados. Con este trabajo se demostró por primera vez la especie del parásito que afecta a esta comunidad, hecho que debe considerarse para establecer medidas de control y tratamiento.

Histopatología del cuerno cutaneo: estudio retrospectivo de 77 casos / Hystopathology of the cutaneous horn: retrospective study of 77 cases

Se realizó un estudio descriptivo, retrospectivo de cinco años en la Sección de Dermatología del Instituto de Biomedicina (1990-1994), revisandose 20.819 reportes, de los cuales 77 fueron enviados con el diagnóstico clínico de cuerno cutáneo. El56 por ciento correspondió al sexo femenino y el 44 por ciento al masculino, en edades comprendidas entre los 16 y 88 años, con predominio de los mayores de 60 años. La localización más frecuente de las lesiones fue la cara y el tiempo de evolución promedio de un año. Los informes histológicos mostraron que las lesiones eran benignas en un 46 por ciento, premalignas en 41 por ciento y malignas (con predominio del carcinoma espino celular) en un 13 por ciento

Comparación de cinco metodos para el diagnóstico de Leishmaniasis cutánea / Comparison of five methods for the diagnosis of cutaneous Leishmaniasis

La Leishmaniasis cutánea es producida por parásitos del género Leishmania, el diagnóstico definitivo se fundamenta en la observación del agente en frotis, cortes histológicos, cultivos y Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). La demostración del parásito es importante para diferenciar la Leishmaniasis de otras entidades clínicas. El objetivo de este trabajo fue comparar 5 métodos utilizados para el diagnóstico de Leishmaniasis y evaluar su sensibilidad. Se evaluaron 42 pacientes de la consulta de Leishmaniasis del Instituto de Biomedicina, a los que se les hizo frotis por escarificado y biopsia de piel para estudio histológico, frotis por aposición, cultivo y PCR. El porcentaje de positividad para cada una de las pruebas fue de 88 por ciento para la frotis por escarificado; 71,4 por ciento para la PCR; 59,5 por ciento tanto en el frotis por aposición como la histopatología y 52,4 por ciento para el cultivo. El frotis por escarificado resultó ser la prueba más sensible, con una diferencia significativa (p<0,05) en la concordancia entre el escarificado y los otros métodos. El escarificado, por ser un método sencillo es ampliamente recomendado para los programas de control de esta enfermedad en áreas endémicas

Isolation of Leishmania infantum, zymodeme MON-1 from canine and human visceral leishmaniasis on Margarita Island, Venezuela

An increase in the incidence of human visceral leishmaniasis (HVL) has been detected in recent years on Margarita Island, located off the NE coast of Venezuela. Recent studies have revealed reactivity to rK39 antigen (Leishmania chagasi) in 20 percent of 541 sera from domestic dogs in endemic communities; PCR reactions were positive using primers for the L. donovani complex. Here we report that isolates from human and canine infection, identified by isoenzyme analysis, correspond to L. infantum, zymodeme MON-1. This appears to be the first isolation and identification of an isolate from HVL on Margarita Island and demonstrates the presence of this zymodeme in the canine population

Leishmaniasis visceral refractaria al tratamiento con antimoniales: descripción de un caso / Refractary visceral leishmaniasis to antimonial treatment: one case description

Describimos el caso de una niña de 30 meses de edad, procedente del Estado Guárico, un foco endémico antiguo de Kala-azar, quien tras haber recibido 7 ciclos con antimonial pentavalente, a elevadas dosis y a intervalos irregulares, persistía con evidencia clínica y presencia del parásito Leishmania en médula ósea además de pancitopenia, hepatoesplenomegalia y fiebre. Se inició tratamiento con anfotericina B a dosis de 0,05 mg/kg peso/día de inicio, con incremento gradualmente hasta alcanzar 1 mg/Kg peso/día y, con una dosis total acumulada de 1 gramo. Se obtuvo excelente respuesta clínica y tolerancia a la droga, con escasos efectos colaterales. Al finalizar el tratamiento, se demostró la ausencia del parásito Leishmania mediante aspirado de médula ósea. Se describe el 5º caso conocido oficialmente, de Kala-azar en la población pediátrica, refractario al tratamiento convencional

Lepra y embarazo fenomenos reaccionales y recaida: a propósito de dos / Pregnancy and leprosy reactionals phenomenons and relapse: a purpose of two cases

El embarazo disminuye fisiológicamente la inmunidad celular en la mujer para proteger al feto; este hecho puede precipitar la aparición de lesiones de lepra, empeorar la enfermedad no producir recaídas en pacientes ya tratadas. Sin embargo, la lepra no tiene efectos graves sobre el embarazo. Presentamos 1 caso de una paciente curada de lepra con recaída durante el embarazo y otra con exacerbación de lesiones y aparición de eritema nodoso leproso durante la gestación